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极性生长研究NMT标准化方案丨中关村认证实验标准

 

 

花粉管检测 Pollen tube detection

 

 

 

花粉管3D测试过程

 

 

 

根毛检测-分子传感器

 

 

 

 

 

1)F2018-001,Science,花粉管,Ca2+

CORNICHON sorting and regulation of GLR channels underlie pollen tube Ca2+ homeostasis

2)C2014-010,孙蒙祥,武汉大学,J EXP BOT,花粉管,Ca2+
Exogenous γ-aminobutyric acid affects pollen tube growth via modulating putative Ca2+-permeable membrane channels and is coupled to negative regulation on glutamate decarboxylase

3)C2014-006,宋纯鹏,河南大学,Plant Cell,根毛/液泡,NH4+/Ca2+

A Receptor-Like Kinase Mediates Ammonium Homeostasis and Is Important for the Polar Growth of Root Hairs in Arabidopsis

4)C2014-004,涂礼莉,华中农业大学,PLANT BIOTECHNOL J,纤维细胞,K+

A peptide hormone gene, GhPSK promotes fibre elongationand contributes to longer and finer cotton fibre


5)C2014-003,张献龙/涂礼莉,华中农业大学,New Phytologist,纤维细胞,Ca2+

The calcium sensor GhCaM7 promotes cotton fiber elongation by modulating reactive oxygen species (ROS) production

6)C2012-013,林金星,中科院植物研究所,Plant Cell,根,IAA

The Signal Transducer NPH3 Integrates the Phototropin1 Photosensor with PIN2-Based Polar Auxin Transport in Arabidopsis Root Phototropism

7)F2011-020,J EXP BOT,花粉管,Cl-
The essential role of anionic transport in plant cells: the pollen tube as a case study

8)F2011-009,Science,花粉管,Ca2+
Glutamate Receptor–Like Genes Form Ca2+ Channels in Pollen Tubes and Are Regulated by Pistil D-Serine

9)C2009-007,林金星,中科院植物研究所,Plant Physiology,花粉管,Ca2+
Combined proteomic and cytological analysis of Ca2+-calmodulin regulation in Picea meyeri pollen tube growth

10)C2009-002,林金星,中科院植物研究所,New Phytologist,花粉管,Ca2+
Nitric oxide modulates the influx of extracellular Ca2+ and actin filament organization during cell wall construction in Pinus bungeana pollen tubes

11)F2007-014,PNAS,根毛,H+
Oscillations in extracellular pH and reactive oxygen species modulate tip growth of Arabidopsis root hairs

 

 

 

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Ca2+、H+

 

 

 

 

1)Ca2+生理功能概述

 

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2)科研案例

检测野生型(Col-0)和不同种类突变体的拟南芥花粉管尖端Ca2+吸收速率,结果显示,花粉管表达单突变体拟南芥GLR(AtGLRs)表现出生长、花粉管质膜Ca2+通道显示的Ca2+流速;但是,高阶突变体AtGLR3.3表现出与假设相反的现象。结合其他数据结果共同揭示了一种机制,即 AtCNIHs 引发 AtGLRs 的排布和活性变化,从而调控Ca2+稳态。

 

(Wudick MM, Portes MT, Michard E, et al. CORNICHON sorting and regulation of GLR channels underlie pollen tube Ca2+ homeostasis. Science. 2018;360(6388):533-536. doi:10.1126/science.aar6464)

 

 

 

 

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1、动物样品

1)细胞

神经细胞、肿瘤细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等

2)组织器官

肿瘤、皮肤、胃粘膜、胰岛、脑(海马体等)、胚胎(大鼠、鱼)、斑马鱼皮肤/鳃、耳蜗、心脏(香螺)、卵(鱼、鸡蛋、爪蟾)、骨骼、角膜、脊椎(豚鼠)、肌肉组织(肌纤维、心肌)

3)其它动物样品

珊瑚、螨虫、昆虫(果蝇幼虫的肠、蟑螂血脑屏障、按蚊、长红锥蝽)、蝌蚪、水蛭、蓝蟹(微感毛)、变形虫、水丝蚓

 

2、植物样品

1)营养器官

根:根、根毛、根瘤
茎:边材、心材、微管形成层、木质部
叶:表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞

2)生殖器官

花:花瓣、花瓣表皮细胞、花粉
种子:整体、胚
果实:果壳、果皮、果肉(苹果、柑橘)、籽粒、棉花纤维、棉桃

3)细胞:植物悬浮细胞、液泡

4)愈伤组织

 

3、微生物样品

酵母细胞、菌丝、菌落、微藻、细菌(大肠杆菌)

 

4、其它生物样品

周丛生物

 

5、非生物样品

金属、混凝土、泥沙、纳米材料、生物医药材料

 

 

 

非损伤微测技术最大的特点就是活体、无损检测,因此动植物材料在检测前,不需要任何的液氮速冻、染色、研磨处理等。

 

1、动物单细胞

因NMT是活体检测,故从培养箱中拿出来后,置于培养皿中,直接检测即可。

 

2、动物组织

因NMT是活体检测,无需提前处理。如检测部位天然暴露在外,如斑马鱼皮肤离子细胞、侧线毛细胞,直接检测即可。如检测部位位于体内,需在检测时暴露出检测部位(可采用麻醉的方式),后检测即可。

 

3、植物根茎叶等组织器官

天然暴露在外的组织器官,例如根、茎、叶的表面,无需任何处理,直接检测即可。水培、土培、砂培、平板培养均可。

 

4、植物原生质体/液泡

因NMT是基于微传感器/探针的非损伤检测,检测时不接触样品,故原生质体、液泡需要从组织或者细胞中,提取出来后检测。

 

5、植物叶片的表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞

无需提前处理。因这些细胞处于组织内部,故检测时采用撕取等方式,暴露出相应细胞即可。

 

6、植物花粉管

离体萌发:在培养皿中萌发一段时间后即可直接检测;在体萌发:将柱头置于培养皿中,待萌发一段时间后即可直接检测。

 

7、植物果实

无需提前处理。如待测部位位于果实内部,需在检测前暴露出相应部位即可。

 

8、植物悬浮细胞
无需提前处理。检测时,置于培养皿中检测即可。

 

 

 

 

 

即瞬时处理,是指在检测过程中,在正常测试液中瞬间加入所需的干旱胁迫溶液(PEG或甘露醇等溶液)的处理方法,目的是为了观察瞬间干旱胁迫下,样品短时间内的离子/分子的变化趋势,即短时效应。

 

2、预处理/提前处理好后检测
是指在干旱胁迫一段较长的时间后(数十分钟/数小时/数天),观察植物离子/分子进出的情况,即长时效应。

 

 

 

检测时,只要求待测部位浸于溶液中(无需整体都浸在溶液里)。

 

 

 

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可以送样检测。目前非损伤微测技术测试服务由中关村NMT产业联盟统筹管理,由遍布全国的25家NMT创新平台服务中心,提供检测服务。

 

 

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请直接联系旭月公司获取设备操作培训服务。

 

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关键词:NMT标准化方案、极性生长

 

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